2024年12月16日

写在前面

  bio-protocol这个标签下的文章，计划记录我在早期科研探索过程中的心得与经验。按“道与术”划分，都会涉及到。既有宏观的看法，也有实际的经验。可能有人会说，这些东西上网上一搜一大把，海量的论文、各种试剂的说明书，都描述的再详细不过，没必要的这样。这是有道理的，因而我打算侧重于心得体悟方面，经验总结算是给自己捋清思路的顺带之作，不同实验室的环境不同，具体细节仅供参考。

  在不同实验室待过后，我曾思考过一个问题: 我以后可能并不会从事某一领域的研究，不同地方的规矩也都各不相同，那么我学习具体操作的意义在何处？这是一个有趣的话题。

  此处的学习，更侧重于对“规则”的学习。在早期，我们学习“规则”的时间是大于学习“技术”的时间的。A实验室习惯a方案，注重a1细节，按照该步骤使用仪器不会出现任何问题；B实验室可能更信服b方案，对b1细节要求十分严格。这就是“环境与变量”。橘生淮南则为橘，生于淮北则为枳，不同地方的设备和试剂，数据分析方法，都可能会对结果产生影响，那么，不变的是什么呢？

  我认为是——“原理与习惯”。如果把我，或者一名临床医学专硕在读的研究生，拉去和生物技术公司的一名实验员相比，我们的实验娴熟度都大概率会落于下风，因为这是对方的工作，而科研只是我们学业工作的要求之一。在这种情况下，一定要明白自我的任务和需求。绝对不只是掌握某一特定造模的方法，或者熟练掌握某一技术的细枝末节，而是洞悉原理，培养习惯。知晓原理是为了让人能够分析实验失败的原因，培养习惯是为了减少犯错的概率。

  此外，还要重点考虑实验设计技能，数据分析技能。“设计实验”指的是在有限的成本范围内达到预期结果，损耗与重复，如果Plan A行不通时的Plan BCDE，全都要考虑在内，而不是过家家式的纸上谈兵；“数据分析”指实验结果的解读溯源，阳性有无意义、阴性说明了什么，等等。这些后续都会涉及，并且保持更新。

  回归主题，本篇作为protocol系列的第一篇，主要是我相对熟悉的动物实验，近期虽然是期末月，但动物实验依旧在开展中，我将陆续记录总结。同时，我也在试着在hexo中插入图片、设置目录与搜索等，以带来更好的阅读体验。

  以上。

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动物实验

  今年进行了许多动物实验，有必要汇总经验以供后续回顾参考。

  这一栏目计划按照我做过的动物实验进行复盘。按亚专业相关分类，有“精神卫生——小鼠行为学实验”，“创伤修复——小鼠/大鼠造瘘实验”，“肿瘤——小鼠成瘤/给药实验”；此外还有仅做观摩，未完全参与的实验，“神经外科——大鼠MCAO模型建立”，“C57雌鼠骨质疏松模型建立”。

  按饲养过程分类，有动物编号、动物抓取、动物给药、动物健康监测、动物样本采集等部分。

  还会涉及实验动物品系选择、实验成本等方面的思考。

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1  动物编号

  在实验过程中，我们时常需要动态监测动物状态，因而要对动物做好编号标记。笔者目前接触到的编号方法主要以几种：

1、打耳标法

2、身体染色法

3、尾巴标记法

打耳标法

优点：是相对常用的一类方法，适用于实验周期长，动物数量较多的情况,具有较好的可视性。

缺点：①会给动物造成一定程度的伤害②可能存在脱落和丢失的情况

  打耳标过程中，动物的耳部会被穿刺，这会引起疼痛。打耳标后，耳部会留下一个小孔，这是对耳部组织的直接损伤，如果打耳标操作不当，如耳标钉的尺寸不合适或者打耳标位置不准确，可能会导致耳部组织撕裂等更严重的损伤，并且容易脱落。

  下图为耳标钳的标准夹持位置。一般在动物耳朵中间靠下的部位，快速握下耳标钳，紧握到底，减少动物疼痛。

  心得：

  ①关于耳标贯穿小鼠耳朵的单层还是双层：网上实验操作一般为单层，实际过程中有时也选择贯穿双层耳。如裸鼠，耳大而薄，单层贯穿，或贯穿位置靠近外侧时都可能出现脱落情况。

  ①关于单侧耳标或双侧耳标：一般均为单侧；笔者经历过双侧耳朵均打标记的情况，右侧为实际记录，左侧为备用观测。双侧打耳标可能给实验动物造成更多的不适，应慎重。